ENADE: Uma mistura de proteínas pode ser separada em função de suas massas através da técnica de eletroforese em gel

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ENADE: Uma mistura de proteínas pode ser separada em função de suas massas através da técnica de eletroforese em gel (em geral, gel de poliacrilamida), em condições de desnaturação, utilizando-se uma solução de dodecilsulfato de sódio (H3 C−(CH2 ) 10−CH2 OSO3 −  Na+, SDS – sodium dodecyl sulfate) e 2-mercaptoetanol (ou 2-tioetanol, HOCH2−CH2 SH). Este último agente visa à redução das ligações dissulfetos entre cadeias de polipeptídeos da mesma proteína e/ou de proteínas diferentes da mistura. Por outro lado, os ânions dodecilsulfato se ligam na proporção de um ânion para cada dois resíduos de aminoácido, conferindo um caráter negativo às proteínas desnaturadas.

a) Qual é o grupo funcional gerado pela redução das ligações dissulfetos?

b) Explique o princípio da separação de proteínas por eletroforese.

c) Qual a importância da formação do complexo proteína-ânion dodecilsulfato para esta separação?

QUESTÃO ANTERIOR:

PADRÃO DE RESPOSTA.
a) O grupo S–H (grupo sulfidrila).

b) A mistura de proteínas é separada por meio da migração específica de íons em solução, quando estes são submetidos à ação de um campo elétrico. A diferença de velocidade de migração se deve às diferenças entre o tamanho e a carga das espécies.

c) O complexo proteína-ânion dodecilsulfato possui uma carga bem mais negativa que a da proteína nativa, o que torna a carga original da proteína irrelevante. Como, em geral, a mobilidade das proteínas, sob essas condições, depende inversamente de suas massas (na verdade, é inversamente proporcional ao logaritmo de suas massas), então é possível separar proteínas de diferentes massas numa mistura.

PRÓXIMA QUESTÃO:

QUESTÃO DISPONÍVEL EM:

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